Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии»




НазваниеМетодические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии»
страница4/5
Дата конвертации19.11.2013
Размер0.63 Mb.
ТипМетодические указания
1   2   3   4   5

12. Использование серологических методов исследования для диагностики сальмонеллезов и выявления различных форм бактерионосительства



В дополнение к микробиологическому методу диагностики в качестве ориентировочных во время вспышек могут быть использованы клинический, эпидемиологический, серологический и молекулярно-генетический методы. Эпидемиологическим подтверждением постановки диагноза является наличие вспышки при условии, что указанный больной подвергался воздействию выявленного фактора риска, а клиническим – обнаружение клинической картины сальмонеллеза.

Использование РПГА для диагностики сальмонеллезов имеет вспомогательное значение, т.к. в крови практически здоровых людей могут присутствовать антитела к антигенам сальмонелл. Вследствие этого понятие «диагностического титра» антител носит весьма условный ориентировочный характер. Следует учитывать и то, что для разных районов страны величина «диагностического титра» будет различной, что связано с территориальными особенностями эпидемической ситуации. Существенно большее диагностическое значение имеет нарастание уровня антител в динамике заболевания, для чего сыворотку нужно брать сразу после выявления больного, а затем в конце первой или в начале второй недели болезни. В более поздние сроки заболевания титр антител снижается, что также может служить диагностическим критерием.

Парные сыворотки должны исследоваться одномоментно (для этого первая сыворотка до исследования должна храниться в замороженном виде).

Условно-диагностическим титром считается титр не ниже 1:320 для взрослых, 1:80 для детей до 6 мес. и 1:110 для детей старше 6 мес.

Положительным нарастанием титра антител считается их 4-х кратное увеличение по отношению к одному и тому же антигену.

При серологической диагностике сальмонеллезов большое диагностическое значение имеют иммуноглобулины, образование которых обусловливает нарастание титра антител в крови лиц, инфицированных сальмонеллами в определенные периоды жизни. При этом наиболее специфичны в диагностическом плане IgG-антитела. Вместе с тем IgM-антитела появляются в крови раньше других. Они могут образовываться и у здоровых лиц в результате «бытовой» иммунизации или вследствие ранее перенесенной инфекции, т. е. IgM-антитела менее специфичны.

IgM-антитела инактивируются при обработке сыворотки крови цистеином, тогда как IgG-антитела резистентны к этому препарату. После обработки сыворотки крови цистеином в РПГА выявляются только IgG-антитела, тем самым повышается специфичность реакции.

Скорость образования антител и их титр зависят от возраста больного, стадии и тяжес­ти течения болезни, состояния преморбидного фона и других факторов, отражаемых в анализе.

Порядок исследования крови человека:

Сыворотку крови взрослых людей исследуют дважды: сразу после поступления больного в стационар и на второй неделе болезни, а при возможности исследование прово­дят и в период реконвалесценции.

Сыворотку крови детей первых двух лет жизни исследуют в динамике сразу после поступления ребенка в стационар, затем каждые 7-10 дней. При невозможности проведения повторных исследований однократное серологическое обследование назначают в следующие сроки в зависимости от возраста ребенка:

до года при легкой и средне-тяжелой формах - на третьей неделе болезни, при тяжелой форме - на четвертый - шестой;

в возрасте одного-трех лет - на второй неделе независимо от тяжести болезни;

старше трех лет независимо от тяжести болезни - на шестой - седьмой день.

В таблице №3 приведен уровень антител в крови детей.

12.1. Постановка РПГА

Сыворотку крови исследуют в РПГА с комплексным антигеном. При высоком (не ниже 1:320) титре или нарастании уровня антител сыворотку исследуют в РПГА со всеми групповыми О-диагностикумами. При этом следует учитывать, что в случае хронического носительства титры суммарных антител могут быть и более низкими. В этом случае при положительном результате бактериологического исследования для выяснения характера носительства необходимо ставить РПГА с цистеином.

12.2.Определение антител в РПГА без цистеина

Для постановки реакции исследуемую сыворотку крови разводят 0,85%-ным раствором натрия хлорида в соотношении 1:10.

Для титрования готовят раствор 0,85%-ного натрия хлорида на фосфатном буфере (рН 7,0-7,2).

В реакции используют коммерческие эритроцитарные сальмонеллезные О-диагностикумы основных серологических групп (А. В, C1, C2, D и Е) и комплексный (полива­лентный) О-диагностикум.

Дальнейшее проведение исследования ведут в соответствии с Инструкцией по применению набора реагентов «Диагностикум эритроцитарный сальмонеллезный О-антигенный жидкий» от 22.08.2008 г. № 6854-Пр/08.


Табл. 3

Уровень антител в крови детей

Возраст ребенка

Суммарные О-антитела

Цистеиноустойчивые О-антитела




титр на первой неделе болезни



максимальный уровень

титр на первой неделе болезни



максимальный уровень




сроки появле­ния, неделя

титр

сроки появления неделя

титр

До Змес

3-6 мес


6—12мес


Старше 1 года

Старше 8 лет

1:20-1:40

1:20-1:80


1:20-1:160


1:80-1:320

1:80-1:320

4-5-я

4-5-я


4-5-я


3-4-я

2-3-я

Не более 1:320

До 1:320


1:320 и выше


1:320 и выше 1:320 и выше

Отсутствуют 1:20 у 10 % детей

1:20 у 30-40% детей

1:80-1:320 1:80-1:320

4-5-я

4-5-я


5-я


3-4-я

2-3-я

1:20-1:40

1:20-1:80


До 1:160


1:320 и выше

1:320 и выше


12.3.Определение антител в РПГА с цистеином

Для определения в сыворотке крови удельного содержания IgG-антител готовят раствор цистеина2. Для этого 10-15 мг солянокислого L-цистеина или «свободного» цистеина квалификации «ч» растворяют в 1 мл 0,1 н. раствора едкого натра с таким расчетом, чтобы рН готового раствора равнялся 7,0-7,2. Готовый раствор хранят не более 1 ч.

Исследуемую сыворотку разводят 0,85 %-ным раствором натрия хлорида в соотношении 1:5 и смешивают с равным объемом раствора цистеина. Пробирку гермети­зируют (резиновой пробкой, лейкопластырем, парафином) и помещают в термостат на 18-20 ч. при температуре 37оС.

Дальнейшее исследование проводят, как указано в п.10.1, при этом в раствор для титрования добавляют 1% нормальной инактивированной сыворотки крови (лошадиной, кроличьей, крупного рогатого скота). Сыворотка должна быть проверена на отсутствие антител к применяемым диагностикумам.

12.4.Учет РПГА и интерпретация результатов

Реакция агглютинации считается положительной, если эритроциты полностью агглютинировались и расположены равномерно по дну лунки или при почти полной агглютинации небольшая часть эритроцитов оседает в центре лунки в виде ровного колеч­ка или пуговки. Иногда при положительной реакции края агглютината в лунках могут слегка сползать, и он принимает вид «зонтика». При отрицательном результате агглютината нет, эритроциты оседают на дне в центре в виде пуговки или ровного колечка.

В случае возникновения вспышки сальмонеллеза серологически обследуют максимальное число лиц, подвергшихся риску заражения или подозреваемых в качестве источника возбудителя инфекции.

При этом обнаружение (обычно в низких титрах) антител в РПГА без цистеина и отсутствие последних при исследовании сыворотки в РПГА с цистеином может расцениваться как транзиторное сальмонеллоносительство.

Достаточно высокий титр в РПГА с цистеином указывает на возможное хроническое сальмонеллоносительство или переболевание сальмонеллезом (даже субклинически) в течение послед­них 1-2 мес.

В случае контроля за бактерионосительством стабильное снижение титра антител (особенно IgG), подтверждаемое отрицательными бактериологическими исследованиями, позволяет сделать заключение об освобождении организма от возбудителя.
1   2   3   4   5

Похожие:

Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconВременные методические указания к изучению санитарных
Настоящие Методические указания разработаны в соответствии с планом гкнт по проблеме
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconМетодические указания по дисциплине «физические основы оптической связи»
Методические указания разработаны кандидатом физико-математических наук, доцентом Нойкиным Ю. М
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconМетодические указания к спецкурсу «Основы психолингвистики»
Методические указания разработаны кандидатом филологических наук, доцентом кафедры русского языка Ф. Г. Самигулиной
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconМетодические указания по курсу «Ландшафты мира и проблемы природопользования» (часть 1) по специальности 013600 Геоэкология
...
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconМетодические указания по чтению текстов на испанском языке о древних культурах центральной и южной Америки для студентов философов и культурологов
Методические указания разработаны преп кафедры французского и испанского языков Родригес А. Э
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconУтверждены Минздравом СССР лабораторная диагностика сальмонеллезов человека и животных, обнаружение сальмонелл в кормах, продуктах питания и объектах внешней среды (методические указания)
Методические указания разработаны: Всесоюзным центром по сальмонеллам Центрального
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconМетодические указания по оценке подлинности и выявлению фальсификации молочной продукции
«Методические указания по оценке подлинности и выявлению фальсификации молочной продукции». Методические указания. – М.: Федеральный...
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconМетодические указания му 5 705-98 "Борьба с комарами, выплаживающимися в подвальных помещениях"
Методические указания разработаны для внедрения и применения Санитарных правил и норм СанПиН 5 541-96 "Требования к организации и...
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconМетодические указания разработаны на кафедре «Иностранные языки»
Английский язык. Грамматика. Сборник упражнений : методические указания для изучения грамматических основ английского языка для студентов...
Методические указания Методические указания разработаны фгун «цнии эпидемиологии» iconМетодические указания му 1 2438-09 Разработаны: Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Ю. В. Демина), фгун «Санкт-Петербургский нии эпидемиологии и микробиологии имени Пастера»
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©tnu.podelise.ru 2013
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница