Моделирование папилломавирусной инфекции




Скачать 39.47 Kb.
НазваниеМоделирование папилломавирусной инфекции
Дата конвертации15.11.2013
Размер39.47 Kb.
ТипДокументы


МОДЕЛИРОВАНИЕ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ IN VITRO И ИЗУЧЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА ПРОТЕФЛАЗИД НА РЕПРОДУКЦИЮ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА[1]


В настоящее время общепризнанным считается, что вирусы папилломы человека (ВПЧ) не имеют экспериментальных моделей in vitro и in vivo. Однако существующие исследования свидетельствуют о том, что культивирование кусочков кондилом, содержащих ВПЧ 11 типа, на поверхности фибробластов, а также заражение методом трансфекции керахоцитов ДНК из клеток, инфицированных вирусом папилломы 16, приводило к включению вирусной ДНК в геном клетки и экспрессии ВПЧ. Для подтверждения этих результатов нами были продолжены исследования по культивированию вирусов папилломы методом трансфекции.


В результате проведенных исследований получена экспериментальная модель культивирования вируса папилломы человека. Продуцирующая ВПЧ-культура клеток получена методом трансфекции ДНК, выделенных из инфицированных клеток больных, суспензионных культур клеток МТ-4 (суспензионная культура лимфобластоидных клеток человека) и перевиваемых клеток ВНК (клетки почки хомяка).


Тестирование ВПЧ осуществляли методом ПЦР, по цитопатическому действию вируса и цитологической характеристике клеток - митотический индекс и аномальные митозы. Было показано, что изоляты ВПЧ тестировались праймерами к ВПЧ 16 (1 образец), праймерами к 31, 35, 39, 59, 18, 33, 45, 52, 58, 67 генотипам (4 образец).


Отличительной чертой цитопатического действия культивируемых ВПЧ является разный характер воздействия на клетки. Высокие дозы вирусов вызывали дегенерацию клеток, а низкие приводили к образованию фокусов трансформации.


Изучение цитологической характеристики инфицированных ВПЧ клеток ВНК позволило установить, что одной из главных характеристик инфицированных клеток является их способность к пролиферации и высокий уровень аномальных митозов.


Предпосылкой для изучения специфического влияния Протефлазида на ВПЧ стало изучение результатов механизмов действия биологически активного вещества Протефлазида. Показано, что биологически активное вещество Протефлазида является активным индуктором α-интерферона, который стимулирует экспрессию генов PRK и РНКазы L, значительно (на 20%) превышающую уровень экспрессии этих генов высокоактивным индуктором интерферона polyI: polyC. Биологически активное вещество Протефлазида эффективно ингибировало синтез РНК в модельной системе транскрипции бактериофага Т7 и синтеза ДНК в условиях ПЦР (Tag-полимераза). Методами компьютерной биологии очерчен вероятный механизм угнетения синтеза РНК - образование стабильного комплекса: лиганд с участком энзима - сайтом связывания субстрата.


Биологически активное вещество Протефлазида в высоких дозах (150 мкамоль/л) тормозит рост клеток, индуцируя в них апоптоз, при этом процесс апоптоза связан с активизацией каспазы-9 [2].


Полученные данные свидетельствуют о том, что лекарственный препарат Протефлазид способен поражать в инфицированных клетках мишени – РНК и ДНК-полимеразы.


Для определения влияния Протефлазида на репродукцию ВПЧ использовали разные схемы обработки препаратом: одновременное введение препарата и вируса, введение препарата через 1 час после заражения вирусом, трехкратное введение препаратов через 1 сутки после инфицирования ВПЧ.


Обработка Протефлазидом в течение короткого срока культивирования (4-5 суток) не приводила, по данным определения ДНК ВПЧ в ПЦР, к ингибиции репродукции культивируемого ВПЧ.


Длительное культивирование вируса с препаратами в клетках ВНК (до 15 суток) приводило к угнетению репродукции ВПЧ на 2 Ig ID50.


Цитологическими исследованиями установлено, что при действии Протефлазида уровень аномальных митозов инфицированных ВПЧ клеток был такой же, как и у интактных клеток. Результатом воздействия Протефлазида являлось существенное уменьшение митотической активности и уровня аномальных форм митозов инфицированных ВПЧ клеток. Эти результаты свидетельствуют об угнетении пролиферативного и деструктивного действия ВПЧ на клетки, чтобы предполагать о возможной клинической эффективности специфического действия Протефлазида на онкогенные папилломовирусы человека.


Литература


  1. ОТЧЕТ «Доклиническое изучение препарата Протефлазид на модели папилломавирусов».


Государственное учреждение «Институт эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л.В. Громашевского Академии медицинских наук Украины» Руководитель НИР - зав. лабораторией экспериментальной химиотерапии вирусных инфекций ГУ «ИЭИБ АМНУ» доктор мед. наук С.Л. Рыбалко

Киев- 2010


  1. ОТЧЕТ о научно-исследовательской работе «ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ ДЕЙСТВИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ

ВЕЩЕСТВ ЛЕЧЕБНОЙ СУБСТАНЦИИ ПРОТЕФЛАЗИДА».


Академия медицинских наук Украины

Государственное учреждение «Институт эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л.В. Громашевского»

03680, г. Киев, ул. Амосова, 5

Научный руководитель работы - д-р мед. наук. С.Л. Рыбалко


Киев -2010


Похожие:

Моделирование папилломавирусной инфекции icon«Инфекции, передаваемые половым путем»: медпресс информ; 2001 isbn 5 901712 04 8
В руководстве «Инфекции, передаваемые половым путем», представлены новые современные сведения как научного, так и клинически обобщенного...
Моделирование папилломавирусной инфекции iconКурсовая работа По дисциплине Моделирование «Счетчик-делитель на 7»
Провести логическое моделирование, отладить схему и разработать тесты для обнаружения неисправностей
Моделирование папилломавирусной инфекции iconПроблема вич-инфекции на данном этапе развития современного общества стала проблемой номер один для Всемирной организации здравоохранения и оон, оттеснив на
Вич-инфекции в Украине составляет 193 тыс. 544 человек. Диагноз спид установлен 42 тысячам 233 больным. По показателям заболеваемости...
Моделирование папилломавирусной инфекции iconОстрые кишечные инфекции, их профилактика
Кишечные инфекции – группа заболеваний, возбудители которых проникают из внешней среды в кишечник, размножаются в нём и выделяются...
Моделирование папилломавирусной инфекции iconМатематическое моделирование и выбор параметров механизмов в комплексе с приводными системами
Специальность 05. 13. 18 – Математическое моделирование, численные методы и комплексы программ
Моделирование папилломавирусной инфекции iconЭкзаменационные вопросы интернам: Этика и деонтология в кдл
Методы лабораторной диагностики вич-инфекции. Алгоритм диагностики вич-инфекции. Факторы, влияющие на результаты
Моделирование папилломавирусной инфекции iconОтчет по результатам научно-исследовательской работы
«Открытое рандомизированное клиническое исследование терапевтической эффективности и безопасности противовирусного препарата Ферровир...
Моделирование папилломавирусной инфекции iconКишечные инфекции
Заражение происходит при попадании возбудителя инфекции через рот, как правило, при употреблении зараженных пищевых продуктов и воды....
Моделирование папилломавирусной инфекции icon7. Грибковые поражения сопр. Проявления в полости рта вич инфекции
Знание основных клинических признаков кандидоза и вич – инфекции, методов лечения этих заболеваний, даёт возможность своевременно...
Моделирование папилломавирусной инфекции iconМетодическая разработка открытого урока по предмету: «Моделирование и художественное оформление прически»
Интегрированный урок (Моделирование и художественное оформление прически + информатика) по теме «Коррекция формы лица и головы с...
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©tnu.podelise.ru 2013
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница